采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-Htetrazolium bromide,MTT)法評價(jià)栽培菊苣籽總黃酮對小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的毒性。從總抗氧化能力、清除2,2’-聯(lián)氮-雙-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽自由基(2,2’-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt cation radical,ABTS+·)能力、清除O2-·能力以及抑制Fe2+誘發(fā)的卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化能力4 個(gè)方面評價(jià)栽培菊苣籽總黃酮的抗氧化活性,并與常見的抗氧化劑VC和叔丁基對苯二酚(tertbutylhydroquinone,TBHQ)作比較。之后采用高效液相色譜(high-performance liquid chromatography,HPLC)法對栽培菊苣籽總黃酮中清除·OH的活性成分進(jìn)行了識別。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,菊苣籽總黃酮質(zhì)量濃度為1 mg/mL時(shí),對RAW264.7細(xì)胞具有一定的毒性,而當(dāng)其質(zhì)量濃度適當(dāng)減小后,則基本無毒性。抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:栽培菊苣籽總黃酮的總抗氧化活性和清除ABTS+·的能力弱于VC和TBHQ,但在低質(zhì)量濃度時(shí),其總抗氧化活性與TBHQ非常接近;在清除O2-·方面,活性由強(qiáng)到弱為VC>菊苣籽總黃酮>TBHQ;在抑制卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化實(shí)驗(yàn)中,栽培菊苣籽總黃酮強(qiáng)于VC,但弱于TBHQ。HPLC法結(jié)果顯示,綠原酸比洋薊素具有更高的清除·OH的活性,且二者對·OH的清除率分別為66.42%和46.00%。
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