構(gòu)建高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶的工程菌株并將其應(yīng)用到2,6-二甲氧基對苯醌的發(fā)酵制備中。通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)從釀酒酵母CS1401的總DNA中擴(kuò)增得到β-葡萄糖苷酶基因,并與載體pPICZαA連接后導(dǎo)入畢赤酵母X33中進(jìn)行甲醇誘導(dǎo)表達(dá);對表達(dá)成功的重組菌株進(jìn)行β-葡萄糖苷酶活力測定;同時將釀酒酵母CS1401和重組菌株接種到小麥胚芽培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵并測定2,6-二甲氧基對苯醌的發(fā)酵產(chǎn)量。結(jié)果表明,釀酒酵母CS1401的β-葡萄糖苷酶基因在畢赤酵母X33工程菌株中得到高效表達(dá),酶活力達(dá)到4.5 U/mL,為釀酒酵母CS1401的5 倍;2,6-二甲氧基對苯醌的搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到935.7 μg/g,比釀酒酵母CS1401提高了0.4 倍。因此,高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶的重組工程菌株在2,6-二甲氧基對苯醌的發(fā)酵制備中具有一定的應(yīng)用前景。
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