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—— 中國(guó)食品雜志社
側(cè)孢短芽孢桿菌抗菌肽具有高效、廣譜、穩(wěn)定的抗菌活性，該抗菌活性與其內(nèi)源質(zhì)粒密切相關(guān)。為研究側(cè)孢短芽孢桿菌含抗菌肽基因質(zhì)粒異源表達(dá)的可行性，本研究中將側(cè)孢短芽孢桿菌S62-9的天然質(zhì)粒電轉(zhuǎn)枯草芽孢桿菌Wb800受體細(xì)胞，篩選陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子并對(duì)其表達(dá)產(chǎn)物性質(zhì)進(jìn)行研究。得到了產(chǎn)生抗菌活性產(chǎn)物菌株Z4，發(fā)酵6 h后開(kāi)始產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，12～20 h產(chǎn)量達(dá)到最大，達(dá)620.96 AU/mL。Tricine-十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳看到S62-9質(zhì)粒在枯草芽孢桿菌中得到了成功的表達(dá)，反相高效液相色譜分析Z4表達(dá)產(chǎn)物含有與側(cè)孢短芽孢桿菌抗菌肽相同物質(zhì)。該物質(zhì)抑菌譜廣，穩(wěn)定性好：對(duì)于G＋、G－和真菌均有抑菌活性，而且對(duì)于G＋菌株的抑菌效果優(yōu)于G－菌株和真菌，121 ℃處理20 min后的效價(jià)保留率約為90%，100 ℃處理60 min后仍有81%的活性保留；pH 2～12的范圍內(nèi)效價(jià)保留率基本不發(fā)生變化；對(duì)蛋白酶較為敏感，胰蛋白酶和蛋白酶K處理后抗菌肽的效價(jià)保留率為60%左右，其他3 種蛋白酶處理后也有一定程度的降低。本研究獲得了抗菌肽的異源表達(dá)菌株Z4，為進(jìn)一步工業(yè)生產(chǎn)抗菌肽提供支持，而且為該抗菌肽遺傳基因定位于質(zhì)粒上提供了證明。
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