利用響應(yīng)面法優(yōu)化酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測呋喃西林代謝物前處理的衍生條件。根據(jù)Box-Behnken試驗設(shè)計原理,在單因素試驗基礎(chǔ)上,以呋喃西林代謝物回收率為響應(yīng)值,應(yīng)用響應(yīng)面分析法研究衍生劑體積、衍生劑濃度、衍生溫度和衍生時間各因素間的交互作用及對呋喃西林代謝物回收率的影響。最終確定ELISA方法線性檢測范圍為0.13~10.51 ng/mL,IC50為1.17 ng/mL;在選取樣品質(zhì)量為2 g時,最佳衍生條件為衍生劑體積415 μL、衍生劑濃度15 mmol/L、衍生溫度57 ℃、衍生時間50 min,實(shí)際回收率為98.57%~103.76%;衍生產(chǎn)物與呋喃西林原藥交叉反應(yīng)率為7.63%,與其他結(jié)構(gòu)類似物、功能類似物及衍生劑交叉反應(yīng)率均小于0.17%;加標(biāo)回收率為93.45%~103.21%,批內(nèi)變異系數(shù)為1.86%~6.15%,批間變異系數(shù)為3.88%~8.84%。該衍生條件高效,檢測方法準(zhǔn)確可靠,適用于動物源性食品中呋喃西林代謝物的快速篩查。
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