為了探究高壓脈沖電場(pulsed electric field,PEF)提高抗氧化肽活性的機(jī)制,以抗氧化肽KWFH為實(shí)驗(yàn)材料,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼為衡量指標(biāo),通過雙因素試驗(yàn)方案,考察電場強(qiáng)度和電場頻率對其活性的影響。經(jīng)過頻率2 400 Hz、電場強(qiáng)度10 kV/cm的PEF處理,抗氧化肽KWFH活性提高了13.92%(P<0.05)。借助傅里葉變換紅外光譜(Fourier transform infrared spectroscopy,F(xiàn)TIR)、核磁共振氫譜(nuclear magnetic resonance,1H-NMR)、Zeta電位及圓二色譜技術(shù),分析高壓脈沖電場技術(shù)對其結(jié)構(gòu)的影響。FTIR分析結(jié)果顯示,經(jīng)過PEF處理的樣品羧酸羰基C=O和苯環(huán)吸收峰強(qiáng)度增強(qiáng);經(jīng)過1H-NMR分析,推測羧酸羰基C=O和苯環(huán)吸收強(qiáng)度變化引起官能團(tuán)攜帶的氫質(zhì)子變化。同時(shí),經(jīng)過PEF處理抗氧化肽KWFH的Zeta電位提高了8.70 mV(P<0.05),進(jìn)一步推測經(jīng)過PEF處理,抗氧化肽KWFH結(jié)構(gòu)更加無序,致使官能團(tuán)暴露,吸收峰強(qiáng)度發(fā)生變化,引起肽活性改變。研究發(fā)現(xiàn)PEF處理對二級結(jié)構(gòu)之間轉(zhuǎn)化沒有影響。這些研究為進(jìn)一步探究PEF技術(shù)提高抗氧化肽活性機(jī)理提供了理論依據(jù)。
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