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熒光假單胞菌、沙門氏菌和單增李斯特菌多重PCR檢測方法的建立
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 152 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 胡冰雪,舒沿沿,潘道東,曾小群,吳 振
關鍵詞: 多重聚合酶鏈式反應;檢測方法;熒光假單胞菌;沙門氏菌;單增李斯特菌
摘要:

針對肉制品中易污染的熒光假單胞菌、沙門氏菌和單增李斯特菌等有害微生物,通過3 種標準菌株及肉制品建立多重聚合酶鏈式反應方法,實現(xiàn)肉制品中這3 種菌的同時、快速檢測。利用熒光假單胞菌的gyrB基因、沙門氏菌的invA基因和單增李斯特菌的hlyA基因設計3 對特異性引物,在確定引物特異性的基礎上,對3 種標準菌株及在冷卻肉上過夜富集后進行靈敏度檢測。結果表明,該多重聚合酶鏈式反應方法對于同時檢測這3 種有害微生物具有高度的特異性;同時檢測這3 種菌時,純菌DNA檢測限可達1 pg/μL;將3 種菌一起接種到冷卻肉中35 ℃過夜培養(yǎng)后,熒光假單胞菌、沙門氏菌和單增李斯特菌的檢測限分別可達到9、5、70 CFU/mL。

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