為了解我國葡萄酒產(chǎn)區(qū)酒酒球菌種質(zhì)資源遺傳多樣性,對(duì)22 株篩選自我國不同葡萄酒產(chǎn)區(qū)的乳酸細(xì)菌進(jìn)行了種特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(species-specific polymerase chain reaction,PCR)分析、16S rRNA序列分析和擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(amplified fragment length polymorphism,AFLP)基因分型。種特異性PCR和16S rRNA序列分析表明22 株分離株為酒酒球菌(Oenococcus oeni)。建立了O. oeni基于HindⅢ和MseⅠ為內(nèi)切酶的AFLP分析體系,對(duì)16 對(duì)引物組合進(jìn)行了篩選,結(jié)果表明HT-MA、HT-MT、HT-MC、HG-MA、HG-MT、HC-MT為O. oeni AFLP分析的最佳引物組合,且實(shí)驗(yàn)重復(fù)性在98%以上。對(duì)O. oeni的AFLP分析結(jié)果顯示:22 株O. oeni分為3 個(gè)簇群,且簇群間遺傳相似性系數(shù)較小。所以,以HindⅢ和MseⅠ為內(nèi)切酶的AFLP技術(shù)是研究O. oeni基因分型的有效方法,我國葡萄酒產(chǎn)區(qū)的O. oeni具有豐富的遺傳多樣性,O. oeni菌株間的遺傳相似性系數(shù)不僅僅與其生態(tài)地理分布有關(guān),可能還與其所處的微生態(tài)和其他因素有關(guān)。
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