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一種基于BALB/c背景由膳食麩質(zhì)引起的乳糜瀉小鼠模型的構(gòu)建及其評價
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 171 發(fā)表時間: 2023-01-03
作者: 宋東筱,任正楠,潘禮龍,孫嘉
關(guān)鍵詞: 乳糜瀉;麩質(zhì);動物模型
摘要:

目的:利用麩質(zhì)誘導(dǎo)建立小鼠乳糜瀉(celiac disease,CeD)模型,通過檢測乳糜瀉相關(guān)指標(biāo)來評價該模型的可行性。方法:將連續(xù)食用無麩質(zhì)飼料3 代以上的雌性BALB/c小鼠(6~8 周齡)隨機(jī)分為兩組(對照組(Control組)和模型組(CeD組)),CeD組于實(shí)驗開始的第1天將飼料換為麩質(zhì)含量2.5 g/kg的含麩質(zhì)飼料,Control組則繼續(xù)飼喂無麩質(zhì)飼料。實(shí)驗前3 周,分別給予CeD組每只小鼠腹腔注射含150 μg麥醇溶蛋白的磷酸鹽緩沖溶液(0.2 mL 0.01 mol/L),每周兩次。在實(shí)驗的第4周,給予CeD組每只小鼠后腳掌注射乳化有50 μg麥醇溶蛋白的弗氏完全佐劑50 μL兩次(第1天和第4天各注射一次)。利用血清熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖質(zhì)量濃度表征小鼠的腸道通透性;利用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測小鼠十二指腸組織中緊密連接蛋白(ZO-1、ZO-2、Claudin-1等)、相關(guān)炎癥因子白細(xì)胞介素((interleukin,IL)-15、干擾素(interferon,IFN)γ和IL-4等)和相關(guān)免疫細(xì)胞的表面標(biāo)志物基因(CD4、CD19、CD138等)的表達(dá)水平;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定小鼠十二指腸中組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG)和連接蛋白水平。結(jié)果:相比Control組,CeD組小鼠十二指腸腸道屏障被明顯破壞,小腸絨毛長度明顯縮短,TGM2 mRNA相對表達(dá)量顯著升高(P<0.05),與乳糜瀉相關(guān)的炎癥因子和免疫細(xì)胞的標(biāo)志物基因相對表達(dá)量都顯著升高。結(jié)論:該造模方法在腸道病理情況、腸道屏障以及免疫方面均能很好地模擬臨床上乳糜瀉的病理學(xué)特征,可用于未來乳糜瀉新的潛在治療措施研究中。

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