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—— 中國食品雜志社
研究分離純化發(fā)酵乳桿菌細胞壁蛋白酶(cell envelope proteinase，CEP)的方法及其酶學性質(zhì)。用50mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH7.8)懸浮菌體，進行超聲波破碎，細胞質(zhì)量濃度為0.06g/mL，破碎功率330W，工作220次(工作時間3s，間隔時間5s)，離心取上清液即為粗酶液。60%硫酸銨沉淀，Sephacryl S-300 HR凝膠層析，Native-PAGE割膠回收純化發(fā)酵乳桿菌的CEP。用純化的CEP 酶解脫脂乳，酶解液ACE(angiotensin I-converting enzyme)抑制率為50%。SDS-PAGE檢測CEP分子質(zhì)量為32.5kD，最適酶反應溫度為41℃，最適酶反應pH值為8.0。Mg2+、Co2+、Ca2+對CEP活性有激活作用；Zn2+、Ni2+、PMSF、EDTA對CEP活性有抑制作用，說明CEP為絲氨酸蛋白酶且酶的活性中心結(jié)構(gòu)的維持與金屬離子有關(guān)。
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