領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
通過PCR技術(shù)從鈍齒棒桿菌(Corynebacterium crenatum)AS1.542基因組中擴(kuò)增得到長度為516bp的argR基因，將其連接到原核表達(dá)載體pET22b(+)，并轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)獲得重組菌株BL21(DE3)/pET22b-argR，以異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)在33℃誘導(dǎo)8h實(shí)現(xiàn)高效可溶性表達(dá)，獲得了一個(gè)分子質(zhì)量為20kD的融合蛋白ArgR。用純化后的目的蛋白免疫小鼠制備多克隆抗體，間接ELISA檢測抗體效價(jià)高達(dá)1:160000。Western blot分析結(jié)果表明，L-精氨酸介導(dǎo)重組蛋白形成的多聚體，可與自制的鼠抗ArgR多克隆抗體進(jìn)行特異性反應(yīng)，與預(yù)期結(jié)果一致，表明ArgR通過與精氨酸共孵育形成了多聚體，該結(jié)果有助于采用凝膠阻滯方法對ArgR蛋白與鈍齒棒桿菌精氨酸生物合成途徑中各操作子的結(jié)合情況進(jìn)行進(jìn)一步研究。
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