領(lǐng)學術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
建立一種恒溫隔絕式聚合酶鏈式反應(yīng)（insulated isothermal polymerase chain reaction，iiPCR）檢測食品中金黃色葡萄球菌的方法。根據(jù)nuc基因設(shè)計特異性引物、探針，并探索針對食品樣品快速提取金黃色葡萄球菌模板DNA的方法；通過優(yōu)化引物、探針及模板的用量，對iiPCR的特異性、靈敏度、穩(wěn)定性進行評價，并利用該方法和傳統(tǒng)PCR方法對人工污染樣品和實際采集食品樣品中的金黃色葡萄球菌進行檢測和比較。結(jié)果表明：水浴法因操作簡便、耗時短、儀器要求不高，適合快速提取模板DNA；建立的iiPCR具有特異性強、靈敏度高、穩(wěn)定性好的特點，且與其他菌無交叉反應(yīng)；對人工污染豬肉樣品和牛奶樣品中的金黃色葡萄球菌，iiPCR方法可在培養(yǎng)至第6小時完成檢測，檢出限為103 CFU/mL和102 CFU/mL，傳統(tǒng)PCR方法8 h后完成檢測，檢出限為105 CFU/mL；針對實際采集的食物樣品，驗證實驗表明iiPCR方法在培養(yǎng)至第6小時的檢出結(jié)果與傳統(tǒng)PCR在培養(yǎng)至第12小時以及傳統(tǒng)培養(yǎng)方法培養(yǎng)至第16小時的檢出結(jié)果一致。證明建立的iiPCR方法能夠更快速準確檢測食品中金黃色葡萄球菌。
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