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長白山林蛙輸卵管糖蛋白多抗制備及應(yīng)用研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 146 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 陳 亮,蘭海楠,鄭 鑫,劉景圣,*
關(guān)鍵詞: 長白山林蛙|輸卵管糖蛋白|抗體|免疫組化
摘要:

針對長白山林蛙輸卵管糖蛋白制備特異性多克隆抗體。將新鮮林蛙輸卵管蛋白粗提液經(jīng)Sepharose Fast Flow陰離子交換柱和Sephadex G-100凝膠層析柱獲得純化的輸卵管糖蛋白組分。以純化輸卵管糖蛋白免疫新西蘭大白兔,制備多抗血清,采用辛酸- 飽和硫酸銨法對多抗進行純化并鑒定。結(jié)果表明:純化后的多抗ELISA 效價為1:64000,純化多抗具有較高的敏感性和特異性,效價較高。利用制備的多抗對長白山林蛙輸卵管分泌細胞進行免疫組織化學(xué)定位,為分泌細胞培養(yǎng)產(chǎn)物中輸卵管糖蛋白進行檢測提供研究條件。

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