本實(shí)驗(yàn)通過測定最小抑菌劑量(minimum inhibitory concentration,MIC)及生長曲線,評(píng)價(jià)松油烯-4-醇對(duì)熒光假單胞菌的抑菌能力;隨后通過堿性磷酸酶活力、電導(dǎo)率測定,二乙酸熒光素染色實(shí)驗(yàn)分析以及掃描電子顯微鏡觀察評(píng)價(jià)松油烯-4-醇對(duì)細(xì)胞壁及細(xì)胞膜通透性的影響;最后通過測定DNA、總蛋白與胞內(nèi)鈉、鉀離子三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)酶活力,來進(jìn)一步探究松油烯-4-醇對(duì)細(xì)胞內(nèi)大分子及細(xì)胞代謝的影響。結(jié)果表明:松油烯-4-醇對(duì)熒光假單胞菌的MIC為2?μL/mL;松油烯-4-醇可有效破壞熒光假單胞菌的細(xì)胞壁,破壞程度隨劑量的升高而增強(qiáng);松油烯-4-醇會(huì)使細(xì)胞膜的通透性增強(qiáng),導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)離子的外滲;掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果表明松油烯-4-醇能對(duì)細(xì)胞膜產(chǎn)生不可逆的破壞;凝膠阻滯電泳分析結(jié)果表明,松油烯-4-醇會(huì)使大分子的DNA泄露;通過測定總蛋白含量與Na+、K+-ATP酶活力可知,松油烯-4-醇能降低細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的含量并能阻滯蛋白質(zhì)的表達(dá)與ATP酶的合成,造成細(xì)胞凋亡。綜上,松油烯-4-醇有望成為新型水產(chǎn)品保鮮劑,本實(shí)驗(yàn)可為拓展天然防腐劑在水產(chǎn)品的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
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