領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
根據(jù)NCBI 上公布的普魯蘭酶基因的保守序列設(shè)計簡并引物，以Thermococcus siculi HJ21 基因組DNA 為模板進(jìn)行PCR，得到T. siculi HJ21 普魯蘭酶的基因，測序后通過Blast(NCBI)數(shù)據(jù)庫比對和分析表明擴(kuò)增基因有一個4056bp、編碼1351 個氨基酸的開放閱讀框，為一新的普魯蘭酶基因。將該基因插入表達(dá)載體pET28a，并轉(zhuǎn)化Escherichia coli BL21(DE3)，經(jīng)IPTG 誘導(dǎo)，測定普魯蘭酶比活力。重組轉(zhuǎn)化子的細(xì)胞破碎液有高溫普魯蘭酶活性，SDS-PAGE 電泳結(jié)果顯示出分子質(zhì)量約為150kD 的特異性條帶。
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