本實(shí)驗(yàn)以植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)B02012和消化乳桿菌(Lactobacillus alimentarius)20998兩株具有相近產(chǎn)酸速率和酸化性能的乳酸菌制備長時發(fā)酵酸面團(tuán)(分別簡稱為SLB02012和SL20998),并以傳統(tǒng)酵母菌長時發(fā)酵酸面團(tuán)(SY)和可食性有機(jī)酸化學(xué)酸化面團(tuán)(SCA)為對照,通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、傅里葉變換紅外光譜(Fourier transform infrared spectrophotometer,F(xiàn)TIR)、內(nèi)源性熒光掃描(intrinsic fluorescence scanning,IFS)、競爭性酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)并結(jié)合層次聚類分析(agglomerative hierarchical clustering,AHC)等方法研究不同發(fā)酵面團(tuán)中小麥蛋白分子二、三級結(jié)構(gòu)及麥醇溶蛋白免疫性的變化和相關(guān)性。SDS-PAGE結(jié)果顯示,乳桿菌的添加對降解面團(tuán)蛋白質(zhì)起主導(dǎo)作用;與面團(tuán)SL20998相比,面團(tuán)SLB02012的高分子質(zhì)量麥谷蛋白及部分麥醇溶蛋白發(fā)生了更明顯降解。FTIR和IFS進(jìn)一步驗(yàn)證,面團(tuán)SLB02012的蛋白分子柔韌性增加,α-螺旋含量下降最明顯,α-螺旋含量/β-折疊含量的比值最小;面團(tuán)SY、SLB02012和SYLB02012的λmax發(fā)生藍(lán)移,而SL20998的λmax發(fā)生紅移,蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)得到伸展。ELISA結(jié)果表明,對比空白組,面團(tuán)SLB02012麥醇溶蛋白的免疫性下降了35%,且與面團(tuán)SCA差異不顯著,而SL20998麥醇溶蛋白的免疫性增加了29.5%。AHC結(jié)果表明,不同發(fā)酵條件獲得的發(fā)酵面團(tuán)中麥醇溶蛋白的二、三級結(jié)構(gòu)及其免疫性呈現(xiàn)良好的聚類關(guān)系。本研究結(jié)果表明,植物乳桿菌B02012可作為制備低敏發(fā)酵制品的優(yōu)勢菌,為進(jìn)一步深入研究乳酸菌降敏機(jī)理提供理論支撐。
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