為提高阿魏酸酯酶(ferulic esterase,F(xiàn)AE)的發(fā)酵單位活力,將土曲霉FAE編碼基因在畢赤酵母實(shí)現(xiàn)異源高效表達(dá)。重組畢赤酵母發(fā)酵活力為(17.38±0.34)U/mL,是原始菌株的35 倍左右。經(jīng)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢驗(yàn)得出,重組土曲霉阿魏酸酯酶(recombinant Aspergillus terreus ferulic esterase,rAtFAE)分子質(zhì)量約為39 kDa。酶學(xué)性質(zhì)研究表明rAtFAE最適pH值為6.0、最適反應(yīng)溫度為50 ℃,以咖啡酸甲酯、香豆酸甲酯、阿魏酸甲酯、芥子酸甲酯為底物時(shí)測(cè)得的kcat/Km值分別為255、237、112.64、96.85 L/(mol·min)。在以麩皮為原料制備阿魏酸的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)中,rAtFAE可以與木聚糖酶產(chǎn)生良好的協(xié)同作用并有效提升阿魏酸的釋放量,最大釋放量為(1 876.45±30.05)μg/g(以麩皮質(zhì)量計(jì))。
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