通過對732陽離子交換樹脂對屎腸球菌谷氨酸脫羧酶(glutamate decarboxylase,GAD,EC4.1.1.15)活性的影響進(jìn)行探討,構(gòu)建了732陽離子交換樹脂-細(xì)胞GAD復(fù)合轉(zhuǎn)化體系。結(jié)果表明:經(jīng)含0.2?mol/L?L-谷氨酸(L-glutamic acid,L-Glu)的0.2?mol/L乙酸-乙酸鈉緩沖液(pH?4.2)平衡的732陽離子交換樹脂可顯著提高屎腸球菌細(xì)胞GAD的轉(zhuǎn)化活性,γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)產(chǎn)量較對照組增加了32.30%;L-Glu/谷氨酸一鈉(monosodium glutamate,MSG)(2∶1)固體混合物能有效調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的pH值和維持反應(yīng)液的底物濃度,顯著增加GABA產(chǎn)量,當(dāng)添加量為30?g/L時(shí),GABA產(chǎn)量較不添加L-Glu/MSG(2∶1)固體混合物的對照組提高了52.40%;732陽離子交換樹脂與L-Glu/MSG(2∶1)固體混合物對細(xì)胞GAD的轉(zhuǎn)化活性具有協(xié)同促進(jìn)作用,適宜的732陽離子交換樹脂-細(xì)胞GAD復(fù)合轉(zhuǎn)化體系組成為732陽離子交換樹脂10?g、0.3?mol/L?MSG溶液(溶于0.2?mol/L乙酸-乙酸鈉緩沖液,pH?4.2)10?mL、100?mg/mL屎腸球菌細(xì)胞懸液10?mL和L-Glu/MSG(2∶1)混合物30?g/L。在該反應(yīng)體系下,80?r/min、40?℃水浴振蕩器反應(yīng)24?h,GABA產(chǎn)量為(4.57±0.11)mmol,較對照組GABA產(chǎn)量((2.29±0.08)mmol)提高了99.56%。
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