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曲酸對南美白對蝦酚氧化酶活性和結(jié)構(gòu)的影響
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 139 發(fā)表時間: 2017-09-28
作者: 呂艷芳,張艷平,蔡路昀,勵建榮,楊銘鐸
關(guān)鍵詞: 南美白對蝦;曲酸;酚氧化酶;酶活;三級結(jié)構(gòu);二級結(jié)構(gòu)
摘要:

為研究曲酸對南美白對蝦酚氧化酶(phenol oxidase,PO)活性和結(jié)構(gòu)的影響,以南美白對蝦頭胸部分離純化出的PO為原料,研究不同濃度曲酸(0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5?mmol/L)對PO活性的抑制,確定曲酸作用PO的抑制類型;通過測定不同濃度曲酸(0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1?mmol/L)處理的PO蛋白內(nèi)源熒光光譜、表面疏水性和二級結(jié)構(gòu)類型含量的變化,研究曲酸對PO空間結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明:隨著作用PO曲酸濃度的增加,PO的剩余酶活逐漸減少,當(dāng)曲酸濃度達(dá)到1.5?mmol/L時,PO的剩余酶活僅為9.8%,參與的反應(yīng)體系褐變指數(shù)變化值為3.02,抑褐變效果明顯;曲酸能夠有效的抑制PO活性,曲酸作用PO的抑制類型屬于競爭性抑制劑;隨著作用PO曲酸濃度的增加,PO的內(nèi)源熒光強(qiáng)度不斷降低,最大發(fā)射波長發(fā)生紅移,PO蛋白表面疏水性先增加后降低;隨著作用PO曲酸濃度的增加,二級結(jié)構(gòu)類型α-螺旋和β-折疊含量降低,無規(guī)則卷曲和β-轉(zhuǎn)角增加。可以推測,曲酸與PO結(jié)合后,酶蛋白空間結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變。

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