目的:采用高血壓發(fā)病因子血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)建立高血壓損傷模型。方法:使用不同濃度(0.01、0.10、1.00 μmol/L和10.00 μmol/L)Ang Ⅱ誘導HUVECs不同時間(3、6、9、12 h和24 h),通過考察HUVECs形態(tài)、活性、功能、微觀結(jié)構(gòu)及凋亡程度來評價HUVECs損傷程度,同時采用交叉設計方差分析和多重比較方法得到Ang Ⅱ最適誘導濃度和最佳誘導時間。結(jié)果:Ang Ⅱ呈濃度依賴式誘導HUVECs損傷,最佳誘導條件為1.00 μmol/L Ang Ⅱ誘導12 h,此時HUVECs活性為44.85%、NO含量為43.57 μmol/L、總一氧化氮合酶活力為6.99 U/mg pro、內(nèi)皮型一氧化氮合酶活力為1.89 U/mg pro、丙二醛含量為7.46 nmol/mL、超氧化物歧化酶活力為27.29 U/mg pro、細胞凋亡率為41.5%,微觀結(jié)構(gòu)顯示核膜皺縮,核仁消失,胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量空泡狀結(jié)構(gòu),線粒體或細小或腫脹,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張數(shù)目較少,部分核糖體丟失,平面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張,但細胞未解體,仍然保持細胞結(jié)構(gòu)。結(jié)論:1.00 μmol/L Ang Ⅱ誘導12 h可以成功誘導HUVECs建立高血壓損傷模型。
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