采用易錯聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù),對來源于天然納米抗體文庫的抗脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)納米抗體進(jìn)行隨機(jī)突變,通過優(yōu)化和比較突變條件,構(gòu)建了突變分布均勻的突變文庫。噬菌體展示技術(shù)對 突變文庫進(jìn)行了6 輪篩選,獲得了8 種突變序列,其檢測信號為野生型2.1 倍。多序列比對及三維結(jié)構(gòu)建模分析表 明,突變序列的突變位點(diǎn)集中于互補(bǔ)決定區(qū)與框架區(qū)連接的區(qū)域,并且部分序列出現(xiàn)了可以形成二硫鍵的氨基酸殘 基。研究結(jié)果為抗DON納米抗體進(jìn)一步的深度突變和改造提供了線索,同時可為其他抗小分子納米抗體的改造提 供借鑒。
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