為進一步提高重組大腸桿菌(pET-23a-pse-LOX)產(chǎn)脂肪氧合酶(lipoxygenase,LOX)的酶活力,利用響應面法對其發(fā)酵條件進行優(yōu)化。通過單因素試驗確定誘導時機、誘導劑濃度、誘導時間、誘導溫度、接種量、培養(yǎng)基初始pH值和裝液量對其發(fā)酵產(chǎn)酶的影響。在此基礎上,采用Plackett-Burman試驗設計從7 個因素中篩選出對LOX產(chǎn)量具有顯著效應的因素為誘導時機、誘導時間和培養(yǎng)基初始pH值,并利用Box-Behnken試驗設計和響應曲面法分析以確定其產(chǎn)酶的最優(yōu)發(fā)酵條件,即誘導時機為菌液OD600 nm達到1.6、誘導時間34 h、培養(yǎng)基初始pH 7.0。在此條件下,LOX酶活力為(21 261.60±264.03) U/mL,比優(yōu)化前的(13 553.96±46.64) U/mL提高了56.87%。
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