本研究探討新疆酸李(Prunus cerasifera Ehrhart)提取物對脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)RAW264.7炎癥模型細(xì)胞的抗炎作用及其潛在的分子機(jī)制。首先,對新疆酸李提取物進(jìn)行乙醇梯度洗脫,并分別檢測不同體積分?jǐn)?shù)乙醇溶液洗脫部位的多酚和黃酮含量以及抗氧化活性;其次,針對體積分?jǐn)?shù)70%乙醇溶液洗脫組分(PCEE-70),分析其對LPS誘導(dǎo)的RAW264.7炎癥細(xì)胞中抗氧化及氧化應(yīng)激有關(guān)生化指標(biāo)的影響;最后,通過蛋白免疫印跡(Western blot,WB)實驗檢測核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信號通路有關(guān)磷酸化及非磷酸化蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果表明,PCEE-70相較于其他洗脫組分具有較高的多酚和黃酮含量,并具有較強(qiáng)的多種抗氧化活性。PCEE-70能明顯降低LPS誘導(dǎo)的RAW264.7炎癥細(xì)胞中NO、活性氧和丙二醛含量,提高乳酸脫氫酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶活力,降低白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)促炎因子的水平。此外,WB結(jié)果表明,PCEE-70能明顯降低LPS誘導(dǎo)的RAW264.7炎癥細(xì)胞中TNF-α、p-NF-κB p65、p-NF-κB抑制蛋白、p-PI3K、p-AKT及p-JNK蛋白的表達(dá)。綜上,PCEE-70能抑制LPS誘導(dǎo)RAW264.7炎癥細(xì)胞炎性因子的分泌,從而延緩氧化應(yīng)激反應(yīng)對細(xì)胞的損傷,其作用機(jī)制與抑制NF-κB和PI3K/AKT信號通路的激活有關(guān)。
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