利用半定量逆轉(zhuǎn)錄多聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技術(shù)研究緩慢降溫和急速降溫兩種降溫方法及早采、中采、晚采3 種采收成熟度鴨梨的采后果心和果肉中過氧化物酶(peroxidase,POD)基因的表達(dá)與鴨梨褐變的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn),緩慢降溫處理的鴨梨果心POD基因表達(dá)量比相同時(shí)期采摘的急速降溫處理的基因表達(dá)量高,這與其對(duì)應(yīng)的褐變指數(shù)相一致,說明POD與鴨梨果實(shí)褐變密切相關(guān),緩慢降溫能有效抑制鴨梨褐變。同時(shí)中采鴨梨的POD基因表達(dá)量最高,早采次之,晚采最低,這進(jìn)一步說明成熟度是影響鴨梨褐變的因素之一。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步構(gòu)建了POD基因cDNA原核表達(dá)載體pET-32a-pbPOD,并成功誘導(dǎo)其在大腸桿菌BL21(DE3)中表達(dá),為進(jìn)一步研究POD表達(dá)量對(duì)鴨梨果實(shí)褐變的機(jī)理提供了參考。
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