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N-糖基化對β-甘露聚糖酶在畢赤酵母中異源表達(dá)的影響
來源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 131 發(fā)表時間: 2017-08-30
作者: 馬清，蔡瑞，姜風(fēng)超，馬立娟，杜麗平，肖冬光
關(guān)鍵詞: β-甘露聚糖酶；N-糖基化；定點(diǎn)突變；酶活力；熱穩(wěn)定性
摘要:

為研究N-糖基化對里氏木霉β-甘露聚糖酶（β-mannanase，Man1）在畢赤酵母GS115中異源表達(dá)的影響， 采用定點(diǎn)突變的方法，將Man1上3 個N-糖基化修飾位點(diǎn)（N131、N158和N329）上的天冬酰胺用中性谷氨酰胺取 代。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，N-糖基化位點(diǎn)的突變對Man1的轉(zhuǎn)錄水平無明顯影響，突變后獲得的Man1表觀分子質(zhì)量有輕微下 降，與Man1相比，3 個突變體N131、N158和N329的甘露聚糖酶活力分別降低了85.43%和79.48%和16.3%；而熱穩(wěn) 定性分別提高了7.87%、13.5%和15.37%。由此可見，N-糖基化修飾對于β-甘露聚糖酶的高效表達(dá)是必需的，其中 N131和N158糖基化位點(diǎn)尤為重要，但是會稍微降低β-甘露聚糖酶的熱穩(wěn)定性。

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