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—— 中國食品雜志社

2011年第32卷17期返回列表

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植物乳桿菌P8亞油酸異構酶基因及其上游非編碼區(qū)的克隆與分析

內(nèi)容: 依據(jù)GenBank中已公布的亞油酸異構酶基因，設計一對特異性引物，PCR擴增該基因后，克隆到T載體上并轉化到Trans1-T1感受態(tài)細胞中。經(jīng)菌落PCR鑒定和序列分析表明，亞油酸異構酶基因大小為1720bp。該基因與植物乳桿菌AS1.555(DQ227322)的同源性達到99%，與泡菜植物乳桿菌(DQ010331)的同源性達到89%。該基因序列在GenBank上注冊，編號為HM569265，對其進行生物信息學分析發(fā)現(xiàn)，基因中含有一段低復雜性區(qū)域。分析乳酸桿菌(CP001617)基因組全序列，設計了亞油酸異

閱讀量: 180 發(fā)表時間: 2017-06-07
鼠李糖乳桿菌JAAS8胞外多糖生物合成基因的克隆及生物信息學分析

內(nèi)容: 根據(jù)已知乳桿菌胞外多糖生物合成基因的同源性，利用其保守區(qū)設計引物，擴增出鼠李糖乳桿菌JAAS8磷蛋白磷酸酶基因(wzb)序列，并通過染色體步移法克隆了鼠李糖乳桿菌 JAAS8 參與胞外多糖生物合成基因簇全部序列 (19.7kb)，利用生物信息學方法預測了基因簇 16個閱讀框的結構和功能。結果表明，該序列與已報道的乳桿菌胞外多糖生物合成基因具有高度同源性。welF、welG、welH、welI、welJ和welE為合成寡糖重復單元的糖基轉移酶基因。rmlA、rmlB和rmlC基因與dTDP-L-鼠李糖前體的

閱讀量: 183 發(fā)表時間: 2017-06-07
冷卻肉中假單胞菌16S rRNA基因不同可變區(qū)片段DGGE研究

內(nèi)容: 為揭示變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術存在的一些技術缺陷，本實驗以冷卻肉中不同假單胞菌相關克隆為例，分別在V3和V6～V8兩個不同可變區(qū)片段比較不同假單胞菌的16S rRNA基因差異。結果表明，以不同可變區(qū)為擴增目標進行研究，假單胞菌的DGGE圖譜結果存在差異；基因片段序列的G+C含量與圖譜中遷移位置并非絕對相關。DGGE技術的這一缺陷很大程度上是由細菌16S rRNA基因序列的自身特性所引起的。

閱讀量: 182 發(fā)表時間: 2017-06-07
響應面優(yōu)化桔青霉產(chǎn)核酸酶P1培養(yǎng)基

內(nèi)容: 采用部分析因試驗設計(FFD)、中心組合實驗設計(CCD)和響應面分析法(RSM)對桔青霉產(chǎn)核酸酶P1培養(yǎng)基進行優(yōu)化研究。FFD結果表明：硫酸鋅、酵母粉、復合磷酸鹽3個因素顯著影響桔青霉發(fā)酵產(chǎn)核酸酶P1，利用最陡爬坡實驗(SAD)使得3個顯著因素的水平取值逼近最大響應區(qū)域，通過CCD和RSM確定了3個顯著性因素的最優(yōu)水平，得到桔青霉發(fā)酵產(chǎn)核酸酶P1的最優(yōu)培養(yǎng)基配方：葡萄糖4%、酵母粉0.681%、玉米漿0.4%、黃豆餅粉0.45%、硫酸鋅0.042%、硫酸鎂0.06%、氯化鈣0.06%、復合磷酸鹽(m(磷

閱讀量: 185 發(fā)表時間: 2017-06-07
大豆球蛋白A1a酸性多肽的原核表達及純化

內(nèi)容: 為建立大豆球蛋白免疫檢測方法及致敏機理的深入研究提供基礎材料，人工合成了大豆球蛋白A1a酸性多肽基因的cDNA序列，通過聚合酶鏈式反應(PCR)和Bam HI、Kpn I雙酶切構建了原核表達載體pET30a-A1a，將重組質粒轉化大腸桿菌(E.coli)BL21后用異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導表達。SDS-PAGE分析表明，A1a酸性多肽融合蛋白能以可溶蛋白形式進行分泌表達，并且誘導5h后，A1a酸性多肽融合蛋白表達量達到最高。經(jīng)His親和層析純化，獲得純度達90%的融合A1a蛋白，分子質

閱讀量: 183 發(fā)表時間: 2017-06-07
產(chǎn)木聚糖酶但無纖維素酶活的微生物的篩選及初步鑒定

內(nèi)容: 為獲得產(chǎn)木聚糖酶但無纖維素酶活性的菌株，本實驗以造紙污水為分離材料，使用底物篩選法得到一株目標菌株，命名為26T。通過生理生化及分子生物學鑒定，初步判定其為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。該菌株在50℃、pH10.0的環(huán)境中生長良好，有較好的耐熱、耐堿性，其產(chǎn)生的木聚糖酶主要分布在細胞外，并且37℃、200r/min搖瓶發(fā)酵12h后酶活力可達14.58U/mL，該菌株在食品工業(yè)中具有很好的應用潛力。

閱讀量: 201 發(fā)表時間: 2017-06-07
菜豆豆莢多酚氧化酶酶學特性研究

內(nèi)容: 目的：了解菜豆豆莢多酚氧化酶(polyphenol Oxidase，PPO)的酶學特性。方法：采用聚丙烯酰氨凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE)法對菜豆豆莢PPO 的最適pH值、最適溫度、底物專一性、激活劑及抑制劑進行研究。結果：菜豆豆莢PPO 最適pH值為6.0；最適溫度為30℃，且溫度為30℃時，該酶具有較強的熱穩(wěn)定性，80℃可使其完全失活；該酶對不同酚類物質表現(xiàn)出不同的底物專一性，鄰苯二酚為該酶的最適底物；抗壞血酸、L-半胱氨酸、β-巰基乙醇、甘

閱讀量: 206 發(fā)表時間: 2017-06-07
發(fā)酵乳桿菌細胞壁蛋白酶的分離純化及酶學性質研究

內(nèi)容: 研究分離純化發(fā)酵乳桿菌細胞壁蛋白酶(cell envelope proteinase，CEP)的方法及其酶學性質。用50mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH7.8)懸浮菌體，進行超聲波破碎，細胞質量濃度為0.06g/mL，破碎功率330W，工作220次(工作時間3s，間隔時間5s)，離心取上清液即為粗酶液。60%硫酸銨沉淀，Sephacryl S-300 HR凝膠層析，Native-PAGE割膠回收純化發(fā)酵乳桿菌的CEP。用純化的CEP 酶解脫脂乳，酶解液ACE(angiotensin I-conv

閱讀量: 184 發(fā)表時間: 2017-06-07
抗氧化活性林蛙胎卵肽水解酶的篩選

內(nèi)容: 以東北林蛙胎卵為原料，以酶解液對DPPH自由基和羥自由基(·OH)清除率為指標，分別研究木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、復合蛋白酶和胰蛋白酶在最佳酶作用條件下酶解時間對酶解液清除DPPH自由基、·OH的影響，篩選出適合生產(chǎn)抗氧化活性林蛙胎卵蛋白肽的堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶，再經(jīng)過復合雙酶酶解林蛙胎卵實驗，結果表明，以中性蛋白酶與堿性蛋白酶復合酶解林蛙胎卵3h得到肽液的·OH清除率與DPPH自由基清除率最高，達到80.91%和70.45%。

閱讀量: 181 發(fā)表時間: 2017-06-07
瘤胃細菌生物合成共軛亞油酸的累積特性

內(nèi)容: 為了解瘤胃細菌生物合成共軛亞油酸(CLA)的特性，通過毛細管電泳(CE)分析，發(fā)現(xiàn)瘤胃細菌生物合成CLA的主要異構體有c9,t11-CLA、t10,c12-CLA和t9,t11-CLA 3種。在厭氧和有氧條件下，瘤胃細菌均能合成CLA，且氧氣有利于CLA的累積，隨反應時間的延長，CLA的量呈現(xiàn)先增加后減少的變化趨勢。結果表明瘤胃細菌參與了反芻動物體內(nèi)CLA異構體的生物合成與代謝，瘤胃細菌生物合成CLA異構體的特異性還有待更深入的研究。

閱讀量: 167 發(fā)表時間: 2017-06-07

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